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提問：
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病毒的培養(yǎng)和檢測
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專家你好：
我是做基層工作的，我們常做大腸桿菌等細(xì)菌的培養(yǎng)，由于病毒培養(yǎng)所要求的條件更加嚴(yán)格，在基層搞病毒培養(yǎng)和檢測有多大難度？請予解答。謝謝！
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答復(fù)：
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動物病毒（見脊椎動物病毒）的培養(yǎng)可在自然宿主、實驗動物、雞胚或細(xì)胞培養(yǎng)中進(jìn)行，以死亡、發(fā)病或病變等作為病毒繁殖的直接指標(biāo)，或以血細(xì)胞凝集、抗原測定等作為間接指標(biāo)。收獲發(fā)病動物的組織磨成懸液或有病變的細(xì)胞培養(yǎng)液，即為粗制病毒。測定活病毒數(shù)量可采用空斑法，其原理與噬斑法相同，但以易感的動物單層細(xì)胞代替細(xì)菌，在接種適當(dāng)稀釋的病毒后，用含有培養(yǎng)液和中性紅的瓊脂覆蓋，使病毒感染局限在小面積內(nèi)形成病變區(qū)，襯底的健康細(xì)胞被中性紅染成紅色，病變區(qū)不染色而顯示為空斑。
除了利用病毒的致病性定量檢測病毒外，還可應(yīng)用物理方法，如在電子顯微鏡下計數(shù)病毒顆粒，或用紫外分光光度計測定提純病毒的蛋白和核酸量，這些方法所測得的數(shù)據(jù)包括了有感染性和無感染性的病毒粒。
應(yīng)用電子顯微鏡不但能看清病毒粒的大小、形態(tài)，還可以分辨其表面的蛋白亞單位和內(nèi)部的核殼等超微結(jié)構(gòu)。
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